Transformación de plantas de arroz (Oryza sativa L. subespecie Indica) de la Variedad Morelos A-92 con el gen de la SPS de Synechocystis

Abstract

Se transformaron plantas de arroz de la variedad Morelos A-92con el gen de la Sacarosa Fosfato Sintasa de Synechocystis. Parala transformación se utilizó el sistema de producción de callosembriogénicos, biobalística, generación de brotes y finalmenteplantas, con el propósito de optimizar algunas de las condicionesdel proceso. Se colocaron semillas de arroz de la variedad MorelosA-92 previamente desinfectadas en medio MS adicionado con 2,4-D y al término de 7 días se obtuvieron callos embriogénicos, loscuales fueron utilizados para ensayos de selección en diferentesconcentraciones de higromicina y también para ensayos deregeneración utilizando diferentes concentraciones de ANA y BAP.Los callos embriogénicos se transformaron mediante biobalística,utilizando los plásmidos pCAMBIA 1301, el cual confiere resistenciaa higromicina, y pUISPSSy, el cual contiene el gen de la SPS deSynechocystis fusionado al promotor CaMV 35S. Se encontró queuna concentración de 50 mg/L de higromicina es suficiente paraseleccionar de manera eficiente a los callos embriogénicos. En elensayo de regeneración sólo se obtuvieron brotes de buen tamaño enel medio adicionado con 2 mg/L de BAP y 0.5 mg/L de ANA, a los25 días. El análisis molecular por PCR confirmó la integración delgen reportero uidA y del gen SPS de Synechocystis.