Palabras clave
Arabidopsis thaliana
tejido vascular
elementos cis
Resumen
El gen At4g12640 de Arabidopsis thaliana codifica para una proteína de tipo Spen (Split ends), de función desconocida. Las proteínas de tipo Spen tienen al menos un dominio RRM, (RNA recognition motif) N-terminal, que permite la unión a ARN y otro dominio llamado SPOC (Spen paralog and ortholog C-terminal), que permite establecer una interacción con otras proteínas, por lo que en general, estas proteínas participan en procesos de regulación genética. El gen At4g12640 es nombrado AtSpen2 en éste trabajo. La región reguladora 5’ del gen AtSpen2 fue analizada con herramientas bioinformáticas. Además, se generaron tres construcciones genéticas con 500, 1000 y 1500 bases de la región reguladora 5’ fusionadas por separado al gen reportero uidA::GFP, usando la tecnología Gateway®. Se transformaron plantas de A. thaliana, obteniendo una eficiencia de entre el 1 y 1.2%. En las plantas transformadas de la generación T3, se observó una expresión similar en las tres versiones de la región promotora 5’ del gen AtSpen2 asociada al tejido vascular. Los resultados sugieren que no existen elementos cis a 1000 y 1500 pb rio arriba del sitio de transcripción de AtSpen2 que intervengan de manera importante en la regulación de la expresión del gen ya que la versión de 500 pb permite la regulación del gen AtSpen2 asociada al tejido vascular y en células que dan lugar a este tejido.
Citas
Hernández-García CM, Finer JJ (2014) Identification and validation of promoters and cis-acting regulatory elements. Plant Science 217: 109–119.
Hornyik C, Terzi LI, Simpson GG (2010) The Spen Family Protein FPA Controls Alternative Cleavage and Polyadenylation of RNA. Developmental Cell 18:203–213
Jefferson RA, Kavanagh TA, Bevan MW (1987) GUS fusions: β-glucuronidase as a sensitive and versatile gene fusion marker in higher plants. EMBO Journal 6: 3901-3907
Kumari S, Ware D (2013) Genome-wide computational prediction and analysis of core promoter elements across plant monocots and dicots. PLoS One 8:e79011. doi: 10.1371/journal.pone.0079011
Malamy JE, Benfey, PN (1997) Organization and cell differentiation in lateral roots of Arabidopsis thaliana. Development 124: 33-44.
Martínez-Trujillo M, Limones-Briones V, Cabrera-Ponce JL, Herrera-Estrella L (2004) Improving transformation efficiency of Arabidopsis thaliana by modifying the floral dip method. Plant. Molecular Biology Reporter 22: 63-70.
McBride KE, Summerfelt KR (1990) Improved binary vectors for Agrobacterium-mediated plant transformation. Plant Molecular Biology 14: 269-276.
Mitsuda N, Ohme-Takagi M (2009) Functional analysis of transcription factors in Arabidopsis. Plant Cell Physiology 50: 1232-1241.
Narlikar L (2014) Multiple novel promoter-architectures revealed by decoding the hidden heterogeneity within the genome. Nucleic Acids Research 42: 12388–12403.
Sambrook J, Russell D (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press. New York.
Schomburg FM, Patton DA, Meinke DW, Amasino RM (2001) FPA, a Gene Involved in Floral Induction in Arabidopsis, Encodes a Protein Containing RNA-Recognition Motifs. The Plant Cell 13: 1427–1436.
Truernit E, Sauer N (1995) The promoter of the Arabidopsis thaliana SUC2 sucrose-H+ symporter gene directs expression of beta-glucuronidase to the phloem: evidence for phloem loading and unloading by SUC2. Planta 196: 564-570.
White RJ (2001) Gene transcription. Blackwell Science, Glasgow UK. 273 pp.